二磺酸酚光度法适合检测饮用水、地下水和清洁地表水等水质相对干净的硝酸盐氮含量，其检测原理是硝酸盐在无水的情况下与酚二磺酸反应，生成硝基二磺酸酚，在碱性溶液中生成黄色化合物，然后进行测定。不过需要注意的是水中含有的氯化物、亚硝酸盐、铵盐、有机物和碳酸盐会对硝酸盐氮检测结果造成干扰，因此要对其进行适当的预处理。下面我们看下水质硝酸盐氮的具体检测步骤。
1.校准曲线的绘制
于一组50mL比色管中,分别硝酸盐氮标准溶液配制表给的标准溶液量用分度吸管分别加入硝酸盐氮标准使用液,加三级试剂水至约40mL。加3mL氨水使成碱性稀释至标线,混匀。在波长410nm处,以三级试剂水为参比,符合下图硝酸盐氮标准使用溶液1的用30mm比色皿测量吸光度,硝酸盐氮标准使用溶液2的用10mm比色皿测量吸光度。由测得的吸光度值减去零浓度管的吸光度值,分别绘制不同比色皿光程长的吸光度对硝酸盐氮含量(mg)的校准曲线。
2.水样预处理
（1）水样浑浊带颜色
可取100mL水样与具塞比色管中，加入2mL氢氧化铝悬浮液，密塞震摇，静置数分钟后，过滤弃去20mL初滤液。
（2）去除水中氯离子
取100mL水样移入具塞比色管中,根据已测定的氯离子含量,加入相当量的硫酸银溶液,充分混合。在暗处放置0.5h,使氯化银沉淀凝聚然后用慢速滤纸过滤,弃去20mL初滤液。
3.水样测定
取50.0mL经预处理的水样于蒸发皿中，用pH试纸检查，必要时用0.5mol/L硫酸或0.1mol/L氢氧化钠溶液调至约pH=8,置水浴上蒸发至干。加1.omL酚二磺酸,用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿内残渣充分接触,静置片刻，再研磨一次，放置10min，加入约10mL三级试剂水。在搅拌下加入3-4mL氨水,使溶液呈现最深的颜色。如有沉淀,则过滤。将溶液移入50mL比色管中,稀释至标线,混匀。于波长410nm处,根据硝酸盐氮含量选用10mm或30mm比色皿，以三级试剂水为参比，测量吸光度。同时以三级试剂水代替水样,按相同步骤进行空白实验。然后通过公式算出水样中硝酸盐氮的含量。
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